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操作細(xì)胞涂片離心機(jī)的正確流程

2025-10-21 [757]
  以下是細(xì)胞涂片離心機(jī)的標(biāo)準(zhǔn)操作流程,涵蓋操作前準(zhǔn)備、核心步驟及關(guān)鍵注意事項(xiàng),適用于血液、體液及脫落細(xì)胞等樣本的薄層涂片制備:
  一、操作前準(zhǔn)備
  環(huán)境與設(shè)備檢查
  確保離心機(jī)放置于水平臺(tái)面,四腳著地以減少振動(dòng);
  核對(duì)電源電壓與設(shè)備銘牌標(biāo)識(shí)一致,檢查急停按鈕功能正常;
  預(yù)熱設(shè)備(若需溫控):設(shè)定目標(biāo)溫度至37℃,待顯示屏顯示實(shí)際溫度達(dá)標(biāo)。
  耗材與試劑準(zhǔn)備
  專用套件:選用帶濾膜的細(xì)胞涂片離心管(含配套載玻片),濾膜孔徑根據(jù)細(xì)胞大小選擇(如5μm用于血細(xì)胞);
  固定液:提前配制95%乙醇或甲醇固定液,置于冰盒備用;
  樣本預(yù)處理:液態(tài)樣本(如腦脊液)無需稀釋,黏稠樣本(如痰液)需用生理鹽水按1:2比例稀釋。
  二、樣本加載與參數(shù)設(shè)置
  加樣規(guī)范
  吸取混勻樣本沿離心管內(nèi)壁緩慢注入,避免產(chǎn)生氣泡;
  對(duì)稱配平:將相同體積的樣本管成對(duì)放入轉(zhuǎn)子,質(zhì)量差≤0.1g(可用天平稱量);
  嚴(yán)禁超載:樣本液面距管口≥1cm,防止離心時(shí)溢出污染轉(zhuǎn)子。
  參數(shù)設(shè)定原則
  轉(zhuǎn)速控制:依據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整——血細(xì)胞/胸腹水細(xì)胞采用800-1000rpm,細(xì)針穿刺標(biāo)本降至600rpm以防破碎;
  離心時(shí)間:常規(guī)5-8分鐘,富集低濃度樣本可延長(zhǎng)至10分鐘;
  剎車模式:選擇“緩剎”程序(減速時(shí)間>3分鐘),避免突然制動(dòng)導(dǎo)致細(xì)胞重懸。
  三、離心執(zhí)行與監(jiān)測(cè)
  啟動(dòng)階段:關(guān)閉艙門后啟動(dòng)程序,觀察顯示屏實(shí)時(shí)監(jiān)控轉(zhuǎn)速上升曲線;
  異常處置:若出現(xiàn)劇烈震動(dòng)或異響,立即按下急停鍵,排查原因(多為配平失效或轉(zhuǎn)子松動(dòng));
  終止判斷:當(dāng)轉(zhuǎn)速歸零且蜂鳴提示后,方可開蓋取片。
  四、制片與后處理
  拆取涂片:捏住載玻片邊緣垂直上提,使濾膜上的細(xì)胞均勻轉(zhuǎn)移至玻片;
  即時(shí)固定:立即將濕片浸入預(yù)冷固定液中靜置15分鐘,破壞細(xì)胞活性并增強(qiáng)附著;
  染色準(zhǔn)備:固定后的涂片經(jīng)梯度酒精脫水,可直接進(jìn)行HE或瑞氏染色。
  五、清潔與維護(hù)
  轉(zhuǎn)子清洗:用75%酒精棉擦拭轉(zhuǎn)子腔隙,清除殘留蛋白;
  更換耗材:一次性離心管按醫(yī)療廢物處理,重復(fù)使用的金屬轉(zhuǎn)子每月潤(rùn)滑軸承;
  記錄管理:登記使用日期、樣本類型、離心參數(shù)及設(shè)備狀態(tài),建立維護(hù)日志。
  關(guān)鍵注意事項(xiàng)
  禁止行為:不得用手強(qiáng)行阻止正在運(yùn)行的轉(zhuǎn)子,勿將非專用試管混入離心;
  安全防護(hù):佩戴護(hù)目鏡與手套,防止氣溶膠噴濺;
  性能驗(yàn)證:每日首檢需空載運(yùn)行測(cè)試,季度校準(zhǔn)轉(zhuǎn)速精度(誤差應(yīng)<±5%)。
  通過規(guī)范操作,可獲得厚度適中(單層細(xì)胞覆蓋率>80%)、形態(tài)完整的細(xì)胞涂片,顯著提升病理診斷的準(zhǔn)確性。不同品牌設(shè)備存在細(xì)微差異,需結(jié)合說明書優(yōu)化參數(shù)。
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